IM MÉDICO #33

im M ÉDICO | 33 73 L as tecnologías de edición genética actualmente en desa- rrolloofrecenunenormepotencial enel tratamientode las enfermedades genéticas en las que una únicamutación es la responsable, como ocurre en la distrofiamuscular de Duchen- ne, la insuficiencia cardíaca congénita, ladeficienciaenalfa-1anti- tripsina hepática o la fibrosis quística, entre otras. A pesar de los significativos avances en las técnicas basadas enCRISPR/Cas9, su uso como terapia requiere la entrega simultánea de unARNguía, la proteína Cas9 y componentes adicionales, difíciles de clonar en un único vector convencional, lo que impone la necesidad de usar virus adenoasociados (AAV) para un direccionamiento eficaz. La creación de roturas de doble cadena empleada en el proceso de reparación del gen defectuoso hace que esta técnica dependa de los mecanismos de reparación genética propios de la célula, particularmente la recombinaciónhomóloga, si bien en algunos casos la no homóloga, basada en la unión de los extre- mos cortados, es también permisible. Estos mecanismos no se encuentran plenamente operativos en células quiescentes, esto es, las que no se dividen, las cuales componen la mayoría de los tejidos. Esto resulta enuna baja eficiencia y en la permanencia de la mutación deletérea en una significativa proporción del tejido, limitando así la eficacia de la terapia. Por otro lado, la inmunidad pre-existente o nueva frente a los AAVs utilizados puede resultar en laneutralizaciónde la terapia. Comoconsecuencia, actualmen- te la técnica CRISPS/Cas9 puede ser usada una única vez, a fin de evitar la amplificación de la respuesta inmunitaria adaptativa. El uso de una única dosis puede, además, ser insuficiente para tratar grandes tejidos, como el hueso o el músculo. La expresión continuada de Cas9 puede también causar roturas acumulativas de doble cadena en otros lugares del genoma, lo que resulta en inserciones y deleciones (indels). Éstas suponen un potencial riesgo, tantopor su capacidadde inactivar genes comode activar oncogenes que pueden conducir a la transformación maligna de la célula. Aunque originalmente se creía que las alteraciones genéticas inducidas por CRISPR/Cas9 estaban circunscritas a la vecindad inmediata del lugar diana, técnicas de genotipado por PCR de largo rango han demostrado que las deleciones de ADN pueden extenderse a lo largo demuchas kilobases, llegándose a registrar incluso entrecruzamientos en localizaciones distales. El riesgode transformaciónoncogénica puede ser particularmente elevado con el usodeAAVs administrados por vía intravenosa, ya que ello facilita el accesoamúltiples tejidos,muchos de los cuales se encuentranmitóticamente activos, tales como lamédula ósea, el hígadoo el intestino, circunstancia que aumenta la vulnerabili- dadde las células. Además, las roturas dedoble cadena inducidas por CRISPR/Cas9 activan la proteína p53, una de cuyas funciones es inducir la muerte celular por apoptosis. Aunque los enfoques dirigidos a inactivar p53 mejoran la eficiencia de la técnica, la reparación de ADN dependiente de p53 se ve comprometida, lo que aumenta la inestabilidad genómica. Edición genética in vitro A pesar de las limitaciones mencionadas, existen enfoques en los que la técnica CRISPR/Cas9 es aplicada in vitro en células madre de médula ósea extraídas del paciente. Después de ser tratadas, las células son expandidas y devueltas al paciente, ofreciendo posibilidades de tratamiento en enfermedades hematológicas como la beta talasemia o la anemia falciforme. En esta última patología la FDA ya ha autorizado el inicio de un ensayo clínico con CTX001, unamodalidad de CRISPR/Cas9 que reemplaza el gen deficiente con el de la hemoglobina fetal. Los datos preliminares indican que CTX001 consigue un nivel de edición superior al 90% en el lugar diana, con un incremento clínicamente relevante de los niveles de hemoglobina. Se espera que un ensayo de fase I/II con el mismo producto tenga su inicio en breve en Europa. En Carburos Metálicos llevamos años trabajando a través del arte, la ciencia y la creatividad para que los hospitales sean más infantiles, llenando de color las ciudades hospitalarias. Cada mes, nuestros valores llevan la ilusión a los niños y niñas hospitalizados, para mejorar su calidad de vida, la de sus familias y el personal sanitario. llusiónate con nosotros y descubre los valores que nos unen. Gracias por ilusionarte nosmuevelailusion.com Las inserciones y deleciones generadas por la tecnología CRISPR/Cas9 suponen un potencial riesgo